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2024-04-01
離子交換層析是生物大分子分離純化中最常用的方法。目標蛋白與離子交換填料發(fā)生靜電相互作用,通過(guò)填料表面的可交換離子與帶相同電荷的蛋白質(zhì)分子發(fā)生交換,從而實(shí)現分離。根據蛋白表面所帶電荷種類(lèi)及強弱的不同,使用中可以根據需要選擇陽(yáng)離子或陰離子交換填料。
月旭的Polymate IEC系列離子交換填料以聚合物為基質(zhì),具有良好的物理化學(xué)穩定性及更高的機械強度,通過(guò)表面親水處理從而對生物活性大分子具有很好的相容性,進(jìn)而修飾不同的離子基團。
該系列產(chǎn)品具有大孔徑、高流速、低反壓的特點(diǎn),可廣泛適用于抗體、蛋白質(zhì)、胰島素、多肽、核酸、抗生素、天然產(chǎn)物等的分離純化。其中大孔徑的特點(diǎn)尤其適用于疫苗抗原、病毒、重組蛋白、抗體等大分子蛋白。
Polymate IEC離子交換層析介質(zhì)
月旭科技推出的Polymate IEC層析介質(zhì)采用親水修飾的丙烯酸酯類(lèi)聚合物作為骨架,孔徑達到2500?,其耐壓性能和傳質(zhì)性能均極佳。
產(chǎn)品特點(diǎn)
01 技術(shù)參數
02 流速-壓力關(guān)系
Polymate IEC離子交換層析介質(zhì)的流速-壓力關(guān)系
03 填料應用
1 層析柱裝填
1)計算待裝填的層析柱的柱體積,按照1.3倍體積取用填料。
2)使用0.2M氯化鈉溶液將填料配置成50%左右濃度的懸浮液。
3)將懸浮填料倒入層析柱中,采用0.2MPa恒壓裝填。
4)填料高度穩定后,標記位置刻度,并將柱頭壓至標記刻度線(xiàn)下3mm處,旋緊柱頭密封圈,裝柱完成。
2 使用方法
新的層析柱的使用通常包括平衡、進(jìn)料、淋洗、洗脫、再生等步驟。
1)平衡:新裝填的層析柱在使用前至少用10CV的平衡緩沖液(如20mM或50mM的PBS或Tris HCl pH 7.2)平衡層析柱,至所有基線(xiàn)穩定。
2)進(jìn)料:樣品盡量使用平衡緩沖液配置,并使用0.45μm濾膜過(guò)濾,按照80%動(dòng)態(tài)載量確定進(jìn)樣量。
3)淋洗:上樣完畢后繼續用平衡緩沖液淋洗至基線(xiàn)。
4)洗脫:使用洗脫液(如含1.5M氯化鈉的高鹽緩沖液)對柱子進(jìn)行沖洗洗脫,洗至基線(xiàn)穩定并收集洗脫液。
5)再生:每次層析之后可用1-2M NaCl 清洗層析柱,除去強結合于介質(zhì)上的蛋白。
6)原位清洗:介質(zhì)載量出現明顯下降之后,為了進(jìn)一步清除一些強結合蛋白,可以使用0.1M-0.5M的氫氧化鈉對柱子進(jìn)行5-10個(gè)柱體積的清洗再生。然后使用平衡緩沖液將柱子沖洗至中性。
7)保存:層析柱使用結束后先用大量超純水將柱內緩沖液進(jìn)行沖洗替換,然后使用20%乙醇進(jìn)一步替換,并密封冷藏(2-5℃)保存。
3 填料儲存
離子交換層析填料出廠(chǎng)時(shí)保存在20%乙醇中,日常應2~5°C冷藏密閉保存。建議每?jì)蓚€(gè)月更換一次保存溶液。
訂貨信息
Polymate EP聚合物基環(huán)氧活化層析介質(zhì)
該基質(zhì)(Polymate EP)表面含有大量環(huán)氧基,孔徑達到2500?,具有使用方便、偶聯(lián)條件溫和、偶聯(lián)效率高和應用范圍廣的特點(diǎn),可直接用于各種配基的偶聯(lián)。
月旭科技Polymate系列微球顯微鏡圖
產(chǎn)品特性
01 技術(shù)參數
02 流速-壓力關(guān)系
訂貨信息
備注:訂貨表中的產(chǎn)品均可提供樣品試用,也可根據客戶(hù)需求定制其他規格。